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一文看懂ODS填料使用要点及注意事项
发布时间:2019-06-18 点击次数:143次
   ODS填料的粒度主要影响填充柱的两个参数,即柱效和背压。粒度越小,其表面积越大,填充柱的柱效超高;然而粒度越小,柱压越大,柱压的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料应用。在相同选择性条件下,提高柱效可提高分离度,但不是因素。
  如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同条件下的5pmODS填料的柱效提高近30%;然而,3um的色谱柱的背压却是5um的2倍。与此同时,柱效提高意味着在相同条件下可以选用更短的色谱柱,即相同的塔板数或分离能力,但是柱长更短,以缩短分析时间。另外,可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度,比如用乙睛代替甲醇,以降低色谱柱的压力。
  ODS填料操作注意要点及注意事项
  1).首先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。
  2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
  3).正常情况下,仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂,则要二次重蒸水冲洗10-20分钟,直至色谱柱中有机相冲净为止)。
  4).一般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器方可稳定,重要的是仪器基线走后,方可进样测试。
  5).同时进两针标样,将其结果相比较,其结果的比值在0.98-1.02之间后,就可以正式进行样品的测试了。
  6).样品测试结束后,就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂,同样也要用重蒸水清洗10-20分钟,方可用有机相进行保护,否则,有损色谱柱。
  7).关机时,先关计算机,再关液相色谱。
  8).填写登记本,由负责人签字。
  注意事项
  1).流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。
  2).柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。
  3).所有过柱子的液体均需严格的过滤。
  4).压力不能太大,不要超过150kgf/cm2.
  5).因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,所以,每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。
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