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浅析YMCC18填料的装填方法
点击次数:106 发布时间:2019-01-24
  精细分离YMCC18填料是在大孔吸附树脂的基础上进行设计和改良的,基体是聚苯乙烯基共聚物或聚甲基丙烯酸酯共聚物。精细反相分离YMCC18填料具有高比表面积,能够耐酸、碱,可以在pH1-14范围内使用,而且与传统的大孔吸附树脂相比,粒径分布范围窄,颗粒粒径小,可以装填出具有较高柱效的色谱柱,达到对物质的精细分离。可用于分析和制备纯化产品。常用于反相色谱体系,用于纯化、分离植物提取物单体、小分子药物、多肽、核酸、蛋白质等。以下是精细YMCC18填料的装填方法。
  装填前准备
  1.装填前准备工作:
  1)柱子清洗干净检查没有明显的破损。
  2)检测密封是否严格。
  3)柱子要竖立与地面垂直。
  4)在装柱前要用装柱的溶剂冲刷色谱柱、柱筛板、管路等。
  所需要的设备有:泵(蠕动泵或恒流泵)、压力表、水平仪、玻璃/或不锈钢层析柱、烧杯或其他容器等。
  2.去除小颗粒
  树脂装填前需要去除小颗粒,因为这种小颗粒会堵塞筛板或砂芯造成整个柱子压降增加,而且YMCC18填料的粒径分布太广也不利于装填后柱子的柱效,因此在柱子装填前要把小颗粒除去。去除步骤如下:
  1)将树脂倒入到适宜的容器中,加入乙醇,玻璃棒搅拌后静止。加入乙醇的体积和静止的时间决定了树脂粒径的大小。
  2)将树脂溶液表面的悬浮物轻轻倒走或抽走。
  3)加入新的乙醇溶液,重复上述1),2)步骤。直到溶液澄清看不到小颗粒为止。
  一、装填
  1.匀浆
  根据所需装填柱子的体积称取适量的YMCC18填料到容器里,容器的体积至少是匀浆体积的2倍,再根据具体的装填方式和装填的YMCC18填料的类型按照表一、二、三制成合理的匀浆。为了充分溶胀,建议可提前将YMCC18填料浸泡在装填溶剂中过夜。
  2.装填
  1)将柱底筛板用装填溶剂润湿,并将溶液放空一部分以便赶走所有的气泡。关闭柱底端出口,并在柱底部留出1~2cm高的装填溶剂。
  2)再次将浆液搅拌均匀,以确保YMCC18填料的均一。
  3)小心将匀浆液倒入层析柱中,并注意避免倒入时产生气泡。
  4)将匀浆液倒入后,用装有装填溶剂的喷壶清洗层析柱的内壁。
  5)自然沉降或抽真空加速沉降,逐步添加至YMCC18填料填满色谱柱。
  6)将柱顶端密封,与泵连接,打开柱底开关打入装填溶剂,流速逐渐加大到目标流速。
  7a恒流速装填法:利用蠕动泵或恒流泵缓慢增加至终流速,这可以避免液压对于所形成的柱床的冲击,也可以避免柱床形成的不均匀。流速可以阶段性地增大,增加量取决于层析柱的柱尺寸和流速。柱床被压缩后。在柱床上部会有空隙,可以补充YMCC18填料,重复加压至YMCC18填料装填满色谱柱。一般来说装填流速是平时常用流速的2-3倍。
  7b.轴向柱装填法缓慢增加至目标压力,这可以避免液压对于所形成的柱床的冲击,也可以避免柱床形成的不均匀。可以通过手动操作减少流速来获得形成柱床所需要的稳定压力。对于YMCC18填料装填一般的压力5-15bar。
  8.当柱床终形成后,关闭泵,并关闭层析柱出口,色谱柱装填完成。
  9.色谱柱装填后为清洗色谱柱和使柱床均一稳定,可以用泵在使用流速下利用装填溶剂清洗柱床5-10倍柱体积。
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